Чтобы сообщить нам о грамматической ошибке на сайте
выделите её и нажмите Ctrl+Enter
Тематические статьи
Глава III Перспективность использования рода хвоща для получения лекарственных препаратов
3.1 Перспективность использования рода хвоща для получения лекарственных препаратов
Как в нашей стране так и за рубежом известно мочегонное действие хвоща полевого. Нами было проведено изучение различных литературных данных и в некоторых из них встречается информация о возможности использования хвоща полевого в косметологии и дерматологии. В таблице 1 представлены результаты исследования, в которой в сравнении с хвощем полевым приведены еще 43 вида лекарственных растений произрастающих на территории Сибири и использующихся в косметологии и дерматологии.
Лекарственные растения
1. Анис обыкновенный - - -/+ -
2. Береза бородавчатая + + -/- -
3. Бузина черная + + -/+ -
4. Василек синий + - -/- -
5. Верба белая + - -/- -
6. Вероника лекарственная + - -/+ -
7. Горечавка крестовидная + - +/- +
8. Донник лекарственный+ + -/- -
9. Душица обыкновенная + + -/- -
10. Зверобой продырявленный + + -/+ -
11. Земляника лесная + - -/- -
12. Календула лекарственная + + -/- -
13. Калина обыкновенная + - +/+ +
14. Крушина ломкая + + -/- +
15. Картофель + + -/- -
16. Клубника дикая + - -/- -
17. Крапива обыкновенная + + -/- -
18. Лопух большой + - +/+ +
19. Лук репчатый + + -/- +
20. Малина обыкновенная + + -/- +
21. Морковь обыкновенная + - -/+ +
22. Медуница лекарственная + + +/+ -
23. Мелисса лекарственная + + -/- +
24. Можжевельник обыкновенный + + -/- +
25. Мята перечная + - -/- +
26. Облепиха крушиновидная + + +/- +
27. Овес полевой + - -/- -
28. Одуванчик лекарственный + + -/- +
29. Петрушка огородная + + +/+ -
30. Подорожник большой + + -/- +
31. Полынь горькая + + -/- +
32. Родиола розовая + + +/- -
33. Шиповник коричный + + -/- -
34. Ромашка аптечная+ - -/- -
35. Ряска малая + - +/- +
36. Сосна обыкновенная + + -/- -
37. Тысячелистник обыкновенный + - -/- +
38. Чемерица Лобеля + + -/- -
39. Череда трехраздельная + + +/- +
40. Фиалка трехцветная + + -/+ -
41. Чабрец обыкновенный + + -/- -
42. Чистотел большой + - +/- +
43. Шалфей лекарственный + + -/- +
44. Хвощ полевой + + +/+ +
Позиция 1 - косметическое средство
Позиция 2 - дермат, аллергии
Позиция 3 - псориаз / экзема
Позиция 4 - антимикробное средство
Из перечисленных 44 видов лекарственных растений 43 вида используются в косметологии. Применение в дерматологии изучалось по следующей активности: антимикробное средство, псориаз, экзема, аллергодерматозы.
Из таблицы 1 видно, что для лечения аллергодерматозов применяются 28 видов из 44 (береза бородавчатая, бузина черная, донник лекарственный, душица обыкновенная, зверобой продырявленный, календула лекарственная, крушина ломкая, картофель, крапива обыкновенная, лук репчатый, малина обыкновенная, медуница лекарственная, мелисса лекарственная, можжевельник обыкновенный, облепиха крушиновидная, одуванчик лекарственный, петрушка огородная, подорожник большой, полынь горькая, родиола розовая, лопух большой, сосна обыкновенная, чемерица Лобеля, череда трехраздельная, фиалка трехцветная, чабрец обыкновенный, шалфей лекарственный, хвощ полевой).
Для лечения псориаза используют 11 видов (горечавка крестовидная, калина обыкновенная, лопух большой, медуница лекарственная, облепиха крушиновидная, петрушка огородная, родиола розовая, ряска малая, череда трехраздельная, чистотел большой, хвощ полевой).
Для лечения экземы применяют 11 видов (анис обыкновенный, бузина черная, вероника лекарственная, зверобой продырявленный, калина обыкновенная, лопух большой, морковь обыкновенная, медуница лекарственная, петрушка огородная, фиалка трехцветная, хвощ полевой).
Результаты таблицы 1 показывают, что некоторые виды обладают антимикробным действием, точнее 20 видов (горечавка крестовидная, калина обыкновенная, крушина ломкая, лопух большой, лук репчатый, малина обыкновенная, морковь обыкновенная, мелиса лекарственная, можжевельник обыкновенный, мята перечная, облепиха крушиновидная, одуванчик лекарственный, подорожник большой, полынь горькая, ряска малая, тысячелистник обыкновенный, череда трехраздельная, чистотел большой, шалфей лекарственный, хвощ полевой).
В результате проведенного анализа следует сказать, что по всем указанным в таблице критериям активности, хвощ полевой является одним из самых перспективных.
3.2 Биологическая активность и перспективность некоторых таксонов для создания лекарственных препаратов
Проводя изучение хвоща полевого, нам представилось интересным определить обладает ли он противогрибковым действием, так же нам хотелось узнать обладают ли таким же действием другие виды хвоща (хвощ зимующий, хвощ болотный, хвощ лесной, хвощ луговой) и определить их перспективность использования для создания лекарственных препаратов.
Антифунгальная активность экстрактов определяли по максимальному разведению, в котором рост грибов был меньше, чем в контроле. В качестве препарата сравнения использовали нистатин.
Результаты исследований представлены в таблицах 2-6.
Экстракт хвоща полевого
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Aspergill. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/15,6 1/125 1/1000 1/500 1/31,3
Этанол 40% 1/250 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/7,8 1/250 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/62,5 1/125 1/1000 1/250
Эфир 1/1000 1/250 1/500 1/1000 1/1000
Из таблицы 2 видно, что экстракт хвоща полевого активен в отнашении таких грибов как Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Aspergillus niger, Microsporum canis, так же видно, что активность выше, когда в качестве экстрагента использовалась вода.
Экстракт хвоща болотного
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. Rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/1000 1/7,8 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Из таблицы 3 видно, что экстракт хвоща болотного проявляет активность только в отношении Trichophyton rubrum, причем активен только водный экстракт.
Экстракт хвоща зимующего
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/1000 1/7.8 1/1000 1/250 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Таблица 4 показывает, что хвощ зимующий активен относительно двух видов грибов: Trichophyton rubrum и Aspergillus niger. Активность проявляет только водный экстракт.
Экстракт хвоща лугового
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. Canis
Вода 100°С 1/1000 1/7,8 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Из таблицы 5 видно, что хвощ луговой обладает не высокой антигрибковой активностью, эффективен лишь водный экстракт в отношении Trichophyton rubrum.
Экстракт хвоща лесного
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 1/1000 1/1000 1/250 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
По данным таблицы 5 можно сделать вывод, что хвощ лесной обладает самой низкой антигрибковой активностью. Активность проявляется у водного извлечения относительно Candida albicans.
Примечание: В условиях нашего опыта за максимальную концентрацию бралось 1000 мкг/мл, так как согласно литературным данным более высокие количества не представляют интереса в плане практического использования растений.
Как видно из данных таблиц, все пять видов исследованного сырья проявили фунгистатическую активность, но в разной степени. Наибольшую активность проявил экстракт хвоща полевого. Он оказался активным в отношении всех пяти использованных тест-культур. Экстракты хвощей болотного, зимующего и лугового оказались активными только в отнашении Tr. rubrum, а экстракт хвоща лесного активен в отнашении Asp. niger.
Фунгистатическая активность меняется в зависимости от выбора экстрагента. Из таблиц видно, что оптимальным экстрагентом является вода горячая.
Глава IV Изучение химического состава рода хвощ
4.1 Качественный состав.
4.1.1 Обнаружение алкалоидов
Проводили спомощью общеосадительных реактивов. Результаты представлены в таблицах 7 и 8.
По таблице 7 видно, что все виды исследуемых хвощей проявили одинаковую чувствительность к реактиву Фреде, по отношению к реактиву Драгендорфа наиболее чувствительными оказались хвощ лесной и хвощ зимующий, с реактивом Вагнера наиболее заметный результат получился в отношении хвоща лугового.
р. Фреде р. Драген-фа р. Вагнера
Хв. полевой + + + +
Хв. луговой + + + + +
Хв. лесной + + + + -
Хв. болотный + + + +
Хв. зимующий + + + + +
Из таблицы 8 видно, что наилучший результат с 1% р-ром фосфорно-вольфрамовой кислоты показали хвощи: луговой, полевой и болотный, с раствором фосфорно-молибденовой кислоты - хвош лесной и хвощ зимующий, с раствором кремниево-вольфрамовой кислоты- полевой, луговой и лесной, с раствором пикриновой кислоты результаты реакций были менее значительны .
1%-е растворы кислот
ф-вольфр. к-та ф-молибд. к-та кр.-вольфр к-та пикринов. к-та
Хв. полевой + + + + + + + -
Хв. луговой + + + + + + + +
Хв. лесной + + + + + + +
Хв. болотный + + + + + + -
Хв. зимующий + + + + + -
Примечание: (-)- отсутствие помутнения, осадка;
(+)- слабая опалесценция;
(+ +)- хорошо заметное помутнение;
(+ + +)- наличие осадка.
Исходя из полученных результатов взаимодействия кислого извлечения из травы хвоща полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного с общеосадительными реактивами на алкалоиды делаем вывод, что данная группа веществ присутствует в исследуемых объектах.
4.1.2 Идентификация флавоноидов
Проба Синода.
При нагревании смеси спиртового извлечения травы хвоща полевого с соляной кислотой и цинком появлялось розовое окрашивание. Такое же окрашивание наблюдалось и в случае хвоща лесного, что говорит о наличии данной группы веществ в исследуемых объектах. В случае остальных объектов (хвощей болотного, лугового, зимующего), видимых изменений окраски не происходило, возможно что в этих объектах флавоноиды находятся в меньшем количестве и необходимы более чувствительные методы для их идентификации.
4.1.3 Определение дубильных веществ
При взаимодействии водных извлечений всех пяти видов исследуемых хвощей с железоаммонийными квасцами образовалось черно-зеленое окрашивание, а в случае хвоща полевого и лесного так же выделился осадок черно-зеленого цвета, что указывает на присутствие группы конденсированных дубильных веществ. Этот результат подтверждается реакцией взаимодействия извлечений с 10% уксусной кислотой и 10% солью ацетата свинца (образовывалось черно-зеленое окрашивание).
4.1.4 Обнаружение сапонинов
Проводили реакцию пенообразования водных извлечений исследуемых объектов с гидроксидом натрия и с соляной кислотой, после встряхивания образовывалась устойчивая пена во всех случаях, что свидетельствует о наличии сапонинов тритерпеновой природы.
4.1.5 Обнаружение алифатических кислот
Исследование алифатических кислот проводилось и ранее, но нам представилось интересным проверить наличие таких кислот как щавелевая, янтарная, яблочная и винная и подтвердить наличие уже известной лимонной кислоты. Исследовалось только водное извлечение хвоща полевого.
Результаты представлены в таблице 9.
Проведенная реакция Результат
1.реакция на щавелевую кислоту Осадка не образовалось
2.р-ция на янтарную кислоту Зеленая флуоресценция не появилась
3.р-ция на лимонную кислоту при нагревании появилось фиолетовое окрашивание
4.р-ция на яблочную кислоту при нанесении на хроматогр. бумагу крайняя зона после разделения флуоресцирует желто-зеленым цветом
5.р-ция на винную кислоту образуется малиновое окрашивание, переходящее при нагревании в вишневое
Результаты таблицы свидетельствуют о наличии в траве хвоща полевого лимонной, яблочной и винной кислот.
4.1.6 Определение полисахаридного комплекса
Для разделения полисахаридного комплекса использовали метод восходящей бумажной хроматографии в системе ацетон:бутанол:вода с использованием сахаров-свидетелей. После обработки хроматограммы анилинфитолатом и нагревания в сушильном шкафу при t° 105°С обнаружились пятна с Rf=0.27 и Rf=0.24, что соответствует ксилозе и арабинозе.
4.1.7 Определение минерального состава
В результате проведения рентгено-флуоресцентного анализа на спектрометре «Спектроскан» сухих остатков хвощей полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного были обнаружены следующие тяжелые металлы: свинец, цинк, никель, медь, кобальт, железо, марганец, хром.
4.1.8 Сесквитерпеновые лактоны
ИК спектры полученной «смолки» в пленке давали полосы поглощения 1750см-1, что свидетельствует о g-лактонной природе выделенной суммы веществ.
4.1.9 Соединения кремния
Реакция образования желтого и синего кремнемолибденового комплекса с молибдатом аммония в кислой среде с использованием в качестве восстановителя аскорбиновой кислоты, подтвердила наличие во всех исследуемых видах соединений кремния.
4.2 Количественное определение.
4.2.1 Определение содержания флавоноидов
Для изучения содержания флавоноидов использовали методику хроматоспектрофотометрического определения. Исследование показало,что наибольшее количество флавоноидов содержится в хвощах полевом и болотном, в остальных исследуемых образцах количество флавоноидов несколько ниже.
Результаты представлены в таблице 10
хвощ полевой хвощ лесной хвощ зимующий хвощ луговой хвощ болотный
3,37% 1,09% 2,83% 3,2% 3,78%
4.2.2 Определение содержания кремния
Определение проводили используя метод фотоколориметрии , результаты исследования показали, что содержание соединений кремния в траве хвоща полевого составило 1,11%, в траве хвоща лесного- 1,12%, в траве хвоща зимующего 2,12%, в траве лугового и болотного соответственно 1,67% и 2,08%.
4.2.3 Изучение содержания экстрактивных веществ в траве хвоща полевого
Определение содержания экстрактивных веществ проводили параллельно с исследованием по выбору экстрагента и времени экстрагирования. Результаты исследования представлены в таблицах.
Из представленных данных в таблице 11 видно, что максимальное количество экстрактивных веществ в траве хвоща полевого извлекается водой очищенной, как холодной так и горячей.
Содержание экстрактивных веществ в траве хвоща полевого в зависимости от экстрагента. (1)
Экстрагент Выход, г %
Этанол 40% 5,78 28,92
Этанол 70% 5,8 29,0
Этанол 96% 1,8 9,0
Вода 20°С 6,88 34,4
Вода 90-100°С 7,31 36,55
Хлороформ 1,4 7,0
Ацетон 0,15 2,14
Исследование времени настаивания на выход экстрактивных веществ показало, что максимальный выход наблюдается после 16-ти часов настаивания и в последующие часы меняется незначительно и находится в пределах от 34 до 34,45. Полученные результаты приведены в таблице 12, в качестве экстрагента использовалась вода горячая.
Влияние времени настаивания на выход экстрактивных веществ хвоща полевого
№ Время экст-ции, час Выход, г Выход, %
1. 12 5,83 29,15
2. 14 6,22 31,1
3. 16 6,86 34,3
4. 18 6,8 34
5. 20 6,89 34,45
4.2.4 Обнаружение эфирных масел
Проводили по фармакопейной методике. В результате проведенного исследования эфирное масло не было обнаружено, поэтому количественное определение не проводили.
4.2.5 Определение полисахаридного комплекса
После фильтрования осадков на воронке Бюхнера, фильтры с осадками высушивали и взвешивали на аналитических весах (перед фильтрованием чистые фильтры также взвешивались на аналитических весах).Результаты представлены в таблице 13.
Содержание полисахаридных фракций в траве хвоща полевого
№ Фракция Масса фильтра, г Масса фильтра с осадком, г Масса осадка, в г в %
1. Фр. А 0,2268 0,4564 0,2296 2,1
2. Фр. Б 0,22537 0,29861 0,07324 0,62
3. Фр. В 0,22076 0,4009 0,18014 1,35
Масса общая 0,48298 4,07
По результатам таблицы 13 следует, что содержание комплекса полисахаридов в траве хвоща полевого составляет около 4,07%. Значительную часть из этого комплекса занимают водорастворимые полисахариды, которые составляют 2,1% (фр.А), чуть меньше содержится полисахаридов гемицеллюлезы и составляет 1,35% (фр. В), пектиновые вещества составляют лишь 0,62%.
4.2.5 Содержание микроэлементов
Результаты таблицы 14 показывают, что в траве хвоща полевого больше всего содержится железа и марганца, в траве хвоща болотного, лугового и зимующего больше железа и цинка, в траве хвоща лесного больше марганца и цинка.
Содержание в образцах свинца, никеля, меди, кобальта, марганца (за исключением полевого), хрома относительно не высокое.
Хвощи Pb Zn Ni Cu Co Fe Mn Cr
Полевой 0,82 11,4 7,44 0,34 1,11 16,5 30,39 1,11
Луговой 1,15 10,2 2,42 0,67 1,43 8,82 4,33 1,43
Зимующий 2,78 26,54 4,67 2,45 2,78 52,8 7,51 0,83
Лесной 1,72 17,5 2,80 1,33 1,72 13,73 30,1 0,52
Болотный 1,52 13,6 1,99 0,59 1,52 56,94 3,21 1,52
Содержание элементов рассчитано в миллиграммах на килограмм сухого остатка.
4.3 Товароведческие показатели
Проведен товароведческий анализ травы хвоща полевого собранного на территории Томской области в 1996-1998 гг. Анализ проводился в соответствии с фармакопейной статьей на хвощ полевой (ГФ XI том 2 ст. 50).Результаты анализа приведены в таблице 15.
Результаты товароведческого анализа
№ Наимен-е показателей качества по НД Требования к качеству по НД Результаты анализа
Описание Стебли до 30 см, жесткие, членистые. Ветви не разветвленные, косо вверх направ-е, влагалища цилиндр-ие. Цвет серо-зеленый, запах слабый, вкус кисловатый. Соответствует
Показатели
1. Влажность не более 13% 7,24%
2. Зола общая не более 24% 18,37%
3. Зола нераств-ая в 10% HCL не более 12% 8,45%
4. Др. частей раст-й не более 1% 0,1%
5. Др. Видов хвощей не более 4% нет
6. Орг. примеси не более 1% 0,15%
7. Минер. примеси не более 0,5% нет
Заключение: сырье соответствует требованиям нормативной документации.
Глава V Разработка технологического процесса получения сухого экстракта
Характеристика готового продукта:
Экстракт хвоща полевого сухой- фармацевтический препарат применяемый в
качестве лекарственного средства.
Экстракт хвоща полевого представляет собой комплекс водорастворимых веществ,
состоящий из сапонинов, полисахаридов, дубильных веществ, алифатических
кислот и других соединений травы хвоща полевого.
Описание:
Аморфный порошок коричневого цвета, гигроскопичен. В герметически закрытой
таре сохраняет сыпучесть, при доступе влаги комкуется.
Своеобразный вкус и запах.
Растворимость: растворим в воде, спирте.
Подлинность.
Реакция на кремний. Образование желтого и синего кремнемолибденового
комплекса с молибдатом аммония в кислой среде. В качестве восстановителя
использовали аскорбиновую кислоту.
К сухому экстракту добавляли 2% раствор хлористоводородной кислоты, добавляли
2 мл 10%-го подкисленного раствора молибдата аммония, наблюдали желтое
окрашивание, при добавлении нескольких кристалликов аскорбиновой кислоты
раствор становился интенсивно-синего цвета.
Реакция на сапонины тритерпеновой природы.
К 0,1 г экстракта добавить 2 мл воды и добавить несколько капель основного
ацетата свинца. Появляется белый осадок, подтверждающий наличие сапонинов
тритерпеновой природы.
Реакция пенообразования (см выше).
Хранение:
В сухом защищенном от света месте при темпиратуре не выше 20°С.
Технологическая схема производства.
ТП 1. Получение исходного извлечения.
1.1 Измельчение травы хвоща полевого.
1.2Удаление пыли.
1.3 Экстракция сырья.
1.4 Отстаивание извлечения.
1.5 Фильтрация извлечения.
ТП 2. Получение готового продукта.
2.1 Упаривание извлечения.
2.2 Сушка извлечения.
2.3 Измельчение готового продукта.
2.4 Фасовка и оформление готовой продукции.
Промежуточные продукты. Сырье. Материалы.
Основным сырьем для получения экстракта хвоща полевого сухого на стадии ТП-1
является измельчение до частиц размером 7мм травы хвоща полевого,
освобождение от пыли (частиц менее 0,25мм). Влажность не более 13%, золы
общей не более 24%.
В качестве экстрагента использовалась вода очищенная при температуре 100°С в
момент подачи на сырье.
На стадии ТП-2. Получаем готовый продукт-комплекс водорастворимых веществ,
состоящи из: сапонинов, дубильных веществ, полисахаридов, алифатических
кислот и других соединений.
Требования к качеству применяемых в производстве сырья и материалов.
Таблица 16
№ наимен-е сырья и материалов № ГОСТ или ТУ Квалификация Сорт или артикул % сод-я осн. вещества
1. Трава хвоща полевого ФС № 50 %
2. Вода очищенная ФС №
Часть 1 | Часть 2 | Часть 3 | Часть 4
3.1 Перспективность использования рода хвоща для получения лекарственных препаратов
Как в нашей стране так и за рубежом известно мочегонное действие хвоща полевого. Нами было проведено изучение различных литературных данных и в некоторых из них встречается информация о возможности использования хвоща полевого в косметологии и дерматологии. В таблице 1 представлены результаты исследования, в которой в сравнении с хвощем полевым приведены еще 43 вида лекарственных растений произрастающих на территории Сибири и использующихся в косметологии и дерматологии.
Tаблица 1
Лекарственные растения
1. Анис обыкновенный - - -/+ -
2. Береза бородавчатая + + -/- -
3. Бузина черная + + -/+ -
4. Василек синий + - -/- -
5. Верба белая + - -/- -
6. Вероника лекарственная + - -/+ -
7. Горечавка крестовидная + - +/- +
8. Донник лекарственный+ + -/- -
9. Душица обыкновенная + + -/- -
10. Зверобой продырявленный + + -/+ -
11. Земляника лесная + - -/- -
12. Календула лекарственная + + -/- -
13. Калина обыкновенная + - +/+ +
14. Крушина ломкая + + -/- +
15. Картофель + + -/- -
16. Клубника дикая + - -/- -
17. Крапива обыкновенная + + -/- -
18. Лопух большой + - +/+ +
19. Лук репчатый + + -/- +
20. Малина обыкновенная + + -/- +
21. Морковь обыкновенная + - -/+ +
22. Медуница лекарственная + + +/+ -
23. Мелисса лекарственная + + -/- +
24. Можжевельник обыкновенный + + -/- +
25. Мята перечная + - -/- +
26. Облепиха крушиновидная + + +/- +
27. Овес полевой + - -/- -
28. Одуванчик лекарственный + + -/- +
29. Петрушка огородная + + +/+ -
30. Подорожник большой + + -/- +
31. Полынь горькая + + -/- +
32. Родиола розовая + + +/- -
33. Шиповник коричный + + -/- -
34. Ромашка аптечная+ - -/- -
35. Ряска малая + - +/- +
36. Сосна обыкновенная + + -/- -
37. Тысячелистник обыкновенный + - -/- +
38. Чемерица Лобеля + + -/- -
39. Череда трехраздельная + + +/- +
40. Фиалка трехцветная + + -/+ -
41. Чабрец обыкновенный + + -/- -
42. Чистотел большой + - +/- +
43. Шалфей лекарственный + + -/- +
44. Хвощ полевой + + +/+ +
Позиция 1 - косметическое средство
Позиция 2 - дермат, аллергии
Позиция 3 - псориаз / экзема
Позиция 4 - антимикробное средство
Из перечисленных 44 видов лекарственных растений 43 вида используются в косметологии. Применение в дерматологии изучалось по следующей активности: антимикробное средство, псориаз, экзема, аллергодерматозы.
Из таблицы 1 видно, что для лечения аллергодерматозов применяются 28 видов из 44 (береза бородавчатая, бузина черная, донник лекарственный, душица обыкновенная, зверобой продырявленный, календула лекарственная, крушина ломкая, картофель, крапива обыкновенная, лук репчатый, малина обыкновенная, медуница лекарственная, мелисса лекарственная, можжевельник обыкновенный, облепиха крушиновидная, одуванчик лекарственный, петрушка огородная, подорожник большой, полынь горькая, родиола розовая, лопух большой, сосна обыкновенная, чемерица Лобеля, череда трехраздельная, фиалка трехцветная, чабрец обыкновенный, шалфей лекарственный, хвощ полевой).
Для лечения псориаза используют 11 видов (горечавка крестовидная, калина обыкновенная, лопух большой, медуница лекарственная, облепиха крушиновидная, петрушка огородная, родиола розовая, ряска малая, череда трехраздельная, чистотел большой, хвощ полевой).
Для лечения экземы применяют 11 видов (анис обыкновенный, бузина черная, вероника лекарственная, зверобой продырявленный, калина обыкновенная, лопух большой, морковь обыкновенная, медуница лекарственная, петрушка огородная, фиалка трехцветная, хвощ полевой).
Результаты таблицы 1 показывают, что некоторые виды обладают антимикробным действием, точнее 20 видов (горечавка крестовидная, калина обыкновенная, крушина ломкая, лопух большой, лук репчатый, малина обыкновенная, морковь обыкновенная, мелиса лекарственная, можжевельник обыкновенный, мята перечная, облепиха крушиновидная, одуванчик лекарственный, подорожник большой, полынь горькая, ряска малая, тысячелистник обыкновенный, череда трехраздельная, чистотел большой, шалфей лекарственный, хвощ полевой).
В результате проведенного анализа следует сказать, что по всем указанным в таблице критериям активности, хвощ полевой является одним из самых перспективных.
3.2 Биологическая активность и перспективность некоторых таксонов для создания лекарственных препаратов
Проводя изучение хвоща полевого, нам представилось интересным определить обладает ли он противогрибковым действием, так же нам хотелось узнать обладают ли таким же действием другие виды хвоща (хвощ зимующий, хвощ болотный, хвощ лесной, хвощ луговой) и определить их перспективность использования для создания лекарственных препаратов.
Антифунгальная активность экстрактов определяли по максимальному разведению, в котором рост грибов был меньше, чем в контроле. В качестве препарата сравнения использовали нистатин.
Результаты исследований представлены в таблицах 2-6.
Tаблица 2
Экстракт хвоща полевого
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Aspergill. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/15,6 1/125 1/1000 1/500 1/31,3
Этанол 40% 1/250 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/7,8 1/250 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/62,5 1/125 1/1000 1/250
Эфир 1/1000 1/250 1/500 1/1000 1/1000
Из таблицы 2 видно, что экстракт хвоща полевого активен в отнашении таких грибов как Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Aspergillus niger, Microsporum canis, так же видно, что активность выше, когда в качестве экстрагента использовалась вода.
Tаблица 3
Экстракт хвоща болотного
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. Rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/1000 1/7,8 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Из таблицы 3 видно, что экстракт хвоща болотного проявляет активность только в отношении Trichophyton rubrum, причем активен только водный экстракт.
Tаблица 4
Экстракт хвоща зимующего
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 100°С 1/1000 1/7.8 1/1000 1/250 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Таблица 4 показывает, что хвощ зимующий активен относительно двух видов грибов: Trichophyton rubrum и Aspergillus niger. Активность проявляет только водный экстракт.
Таблица 5
Экстракт хвоща лугового
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. Canis
Вода 100°С 1/1000 1/7,8 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Из таблицы 5 видно, что хвощ луговой обладает не высокой антигрибковой активностью, эффективен лишь водный экстракт в отношении Trichophyton rubrum.
Таблица 6
Экстракт хвоща лесного
Экстрагент Trichophyton mentagroph. Trichophyt. rubrum Candida albicans Asperg. niger Microsp. canis
Вода 1/1000 1/1000 1/250 1/1000 1/1000
Этанол 40% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Этанол 70% 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
ХЛФ 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
Эфир 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000 1/1000
По данным таблицы 5 можно сделать вывод, что хвощ лесной обладает самой низкой антигрибковой активностью. Активность проявляется у водного извлечения относительно Candida albicans.
Примечание: В условиях нашего опыта за максимальную концентрацию бралось 1000 мкг/мл, так как согласно литературным данным более высокие количества не представляют интереса в плане практического использования растений.
Как видно из данных таблиц, все пять видов исследованного сырья проявили фунгистатическую активность, но в разной степени. Наибольшую активность проявил экстракт хвоща полевого. Он оказался активным в отношении всех пяти использованных тест-культур. Экстракты хвощей болотного, зимующего и лугового оказались активными только в отнашении Tr. rubrum, а экстракт хвоща лесного активен в отнашении Asp. niger.
Фунгистатическая активность меняется в зависимости от выбора экстрагента. Из таблиц видно, что оптимальным экстрагентом является вода горячая.
Глава IV Изучение химического состава рода хвощ
4.1 Качественный состав.
4.1.1 Обнаружение алкалоидов
Проводили спомощью общеосадительных реактивов. Результаты представлены в таблицах 7 и 8.
По таблице 7 видно, что все виды исследуемых хвощей проявили одинаковую чувствительность к реактиву Фреде, по отношению к реактиву Драгендорфа наиболее чувствительными оказались хвощ лесной и хвощ зимующий, с реактивом Вагнера наиболее заметный результат получился в отношении хвоща лугового.
Таблица 7
р. Фреде р. Драген-фа р. Вагнера
Хв. полевой + + + +
Хв. луговой + + + + +
Хв. лесной + + + + -
Хв. болотный + + + +
Хв. зимующий + + + + +
Из таблицы 8 видно, что наилучший результат с 1% р-ром фосфорно-вольфрамовой кислоты показали хвощи: луговой, полевой и болотный, с раствором фосфорно-молибденовой кислоты - хвош лесной и хвощ зимующий, с раствором кремниево-вольфрамовой кислоты- полевой, луговой и лесной, с раствором пикриновой кислоты результаты реакций были менее значительны .
Таблица 8
1%-е растворы кислот
ф-вольфр. к-та ф-молибд. к-та кр.-вольфр к-та пикринов. к-та
Хв. полевой + + + + + + + -
Хв. луговой + + + + + + + +
Хв. лесной + + + + + + +
Хв. болотный + + + + + + -
Хв. зимующий + + + + + -
Примечание: (-)- отсутствие помутнения, осадка;
(+)- слабая опалесценция;
(+ +)- хорошо заметное помутнение;
(+ + +)- наличие осадка.
Исходя из полученных результатов взаимодействия кислого извлечения из травы хвоща полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного с общеосадительными реактивами на алкалоиды делаем вывод, что данная группа веществ присутствует в исследуемых объектах.
4.1.2 Идентификация флавоноидов
Проба Синода.
При нагревании смеси спиртового извлечения травы хвоща полевого с соляной кислотой и цинком появлялось розовое окрашивание. Такое же окрашивание наблюдалось и в случае хвоща лесного, что говорит о наличии данной группы веществ в исследуемых объектах. В случае остальных объектов (хвощей болотного, лугового, зимующего), видимых изменений окраски не происходило, возможно что в этих объектах флавоноиды находятся в меньшем количестве и необходимы более чувствительные методы для их идентификации.
4.1.3 Определение дубильных веществ
При взаимодействии водных извлечений всех пяти видов исследуемых хвощей с железоаммонийными квасцами образовалось черно-зеленое окрашивание, а в случае хвоща полевого и лесного так же выделился осадок черно-зеленого цвета, что указывает на присутствие группы конденсированных дубильных веществ. Этот результат подтверждается реакцией взаимодействия извлечений с 10% уксусной кислотой и 10% солью ацетата свинца (образовывалось черно-зеленое окрашивание).
4.1.4 Обнаружение сапонинов
Проводили реакцию пенообразования водных извлечений исследуемых объектов с гидроксидом натрия и с соляной кислотой, после встряхивания образовывалась устойчивая пена во всех случаях, что свидетельствует о наличии сапонинов тритерпеновой природы.
4.1.5 Обнаружение алифатических кислот
Исследование алифатических кислот проводилось и ранее, но нам представилось интересным проверить наличие таких кислот как щавелевая, янтарная, яблочная и винная и подтвердить наличие уже известной лимонной кислоты. Исследовалось только водное извлечение хвоща полевого.
Результаты представлены в таблице 9.
Таблица 9
Проведенная реакция Результат
1.реакция на щавелевую кислоту Осадка не образовалось
2.р-ция на янтарную кислоту Зеленая флуоресценция не появилась
3.р-ция на лимонную кислоту при нагревании появилось фиолетовое окрашивание
4.р-ция на яблочную кислоту при нанесении на хроматогр. бумагу крайняя зона после разделения флуоресцирует желто-зеленым цветом
5.р-ция на винную кислоту образуется малиновое окрашивание, переходящее при нагревании в вишневое
Результаты таблицы свидетельствуют о наличии в траве хвоща полевого лимонной, яблочной и винной кислот.
4.1.6 Определение полисахаридного комплекса
Для разделения полисахаридного комплекса использовали метод восходящей бумажной хроматографии в системе ацетон:бутанол:вода с использованием сахаров-свидетелей. После обработки хроматограммы анилинфитолатом и нагревания в сушильном шкафу при t° 105°С обнаружились пятна с Rf=0.27 и Rf=0.24, что соответствует ксилозе и арабинозе.
4.1.7 Определение минерального состава
В результате проведения рентгено-флуоресцентного анализа на спектрометре «Спектроскан» сухих остатков хвощей полевого, лугового, лесного, зимующего и болотного были обнаружены следующие тяжелые металлы: свинец, цинк, никель, медь, кобальт, железо, марганец, хром.
4.1.8 Сесквитерпеновые лактоны
ИК спектры полученной «смолки» в пленке давали полосы поглощения 1750см-1, что свидетельствует о g-лактонной природе выделенной суммы веществ.
4.1.9 Соединения кремния
Реакция образования желтого и синего кремнемолибденового комплекса с молибдатом аммония в кислой среде с использованием в качестве восстановителя аскорбиновой кислоты, подтвердила наличие во всех исследуемых видах соединений кремния.
4.2 Количественное определение.
4.2.1 Определение содержания флавоноидов
Для изучения содержания флавоноидов использовали методику хроматоспектрофотометрического определения. Исследование показало,что наибольшее количество флавоноидов содержится в хвощах полевом и болотном, в остальных исследуемых образцах количество флавоноидов несколько ниже.
Результаты представлены в таблице 10
Таблица 10
хвощ полевой хвощ лесной хвощ зимующий хвощ луговой хвощ болотный
3,37% 1,09% 2,83% 3,2% 3,78%
4.2.2 Определение содержания кремния
Определение проводили используя метод фотоколориметрии , результаты исследования показали, что содержание соединений кремния в траве хвоща полевого составило 1,11%, в траве хвоща лесного- 1,12%, в траве хвоща зимующего 2,12%, в траве лугового и болотного соответственно 1,67% и 2,08%.
4.2.3 Изучение содержания экстрактивных веществ в траве хвоща полевого
Определение содержания экстрактивных веществ проводили параллельно с исследованием по выбору экстрагента и времени экстрагирования. Результаты исследования представлены в таблицах.
Из представленных данных в таблице 11 видно, что максимальное количество экстрактивных веществ в траве хвоща полевого извлекается водой очищенной, как холодной так и горячей.
Содержание экстрактивных веществ в траве хвоща полевого в зависимости от экстрагента. (1)
Таблица 11
Экстрагент Выход, г %
Этанол 40% 5,78 28,92
Этанол 70% 5,8 29,0
Этанол 96% 1,8 9,0
Вода 20°С 6,88 34,4
Вода 90-100°С 7,31 36,55
Хлороформ 1,4 7,0
Ацетон 0,15 2,14
Исследование времени настаивания на выход экстрактивных веществ показало, что максимальный выход наблюдается после 16-ти часов настаивания и в последующие часы меняется незначительно и находится в пределах от 34 до 34,45. Полученные результаты приведены в таблице 12, в качестве экстрагента использовалась вода горячая.
Таблица 12
Влияние времени настаивания на выход экстрактивных веществ хвоща полевого
№ Время экст-ции, час Выход, г Выход, %
1. 12 5,83 29,15
2. 14 6,22 31,1
3. 16 6,86 34,3
4. 18 6,8 34
5. 20 6,89 34,45
4.2.4 Обнаружение эфирных масел
Проводили по фармакопейной методике. В результате проведенного исследования эфирное масло не было обнаружено, поэтому количественное определение не проводили.
4.2.5 Определение полисахаридного комплекса
После фильтрования осадков на воронке Бюхнера, фильтры с осадками высушивали и взвешивали на аналитических весах (перед фильтрованием чистые фильтры также взвешивались на аналитических весах).Результаты представлены в таблице 13.
Таблица 13
Содержание полисахаридных фракций в траве хвоща полевого
№ Фракция Масса фильтра, г Масса фильтра с осадком, г Масса осадка, в г в %
1. Фр. А 0,2268 0,4564 0,2296 2,1
2. Фр. Б 0,22537 0,29861 0,07324 0,62
3. Фр. В 0,22076 0,4009 0,18014 1,35
Масса общая 0,48298 4,07
По результатам таблицы 13 следует, что содержание комплекса полисахаридов в траве хвоща полевого составляет около 4,07%. Значительную часть из этого комплекса занимают водорастворимые полисахариды, которые составляют 2,1% (фр.А), чуть меньше содержится полисахаридов гемицеллюлезы и составляет 1,35% (фр. В), пектиновые вещества составляют лишь 0,62%.
4.2.5 Содержание микроэлементов
Результаты таблицы 14 показывают, что в траве хвоща полевого больше всего содержится железа и марганца, в траве хвоща болотного, лугового и зимующего больше железа и цинка, в траве хвоща лесного больше марганца и цинка.
Содержание в образцах свинца, никеля, меди, кобальта, марганца (за исключением полевого), хрома относительно не высокое.
Таблица 14
Хвощи Pb Zn Ni Cu Co Fe Mn Cr
Полевой 0,82 11,4 7,44 0,34 1,11 16,5 30,39 1,11
Луговой 1,15 10,2 2,42 0,67 1,43 8,82 4,33 1,43
Зимующий 2,78 26,54 4,67 2,45 2,78 52,8 7,51 0,83
Лесной 1,72 17,5 2,80 1,33 1,72 13,73 30,1 0,52
Болотный 1,52 13,6 1,99 0,59 1,52 56,94 3,21 1,52
Содержание элементов рассчитано в миллиграммах на килограмм сухого остатка.
4.3 Товароведческие показатели
Проведен товароведческий анализ травы хвоща полевого собранного на территории Томской области в 1996-1998 гг. Анализ проводился в соответствии с фармакопейной статьей на хвощ полевой (ГФ XI том 2 ст. 50).Результаты анализа приведены в таблице 15.
Таблица 15
Результаты товароведческого анализа
№ Наимен-е показателей качества по НД Требования к качеству по НД Результаты анализа
Описание Стебли до 30 см, жесткие, членистые. Ветви не разветвленные, косо вверх направ-е, влагалища цилиндр-ие. Цвет серо-зеленый, запах слабый, вкус кисловатый. Соответствует
Показатели
1. Влажность не более 13% 7,24%
2. Зола общая не более 24% 18,37%
3. Зола нераств-ая в 10% HCL не более 12% 8,45%
4. Др. частей раст-й не более 1% 0,1%
5. Др. Видов хвощей не более 4% нет
6. Орг. примеси не более 1% 0,15%
7. Минер. примеси не более 0,5% нет
Заключение: сырье соответствует требованиям нормативной документации.
Глава V Разработка технологического процесса получения сухого экстракта
Характеристика готового продукта:
Экстракт хвоща полевого сухой- фармацевтический препарат применяемый в
качестве лекарственного средства.
Экстракт хвоща полевого представляет собой комплекс водорастворимых веществ,
состоящий из сапонинов, полисахаридов, дубильных веществ, алифатических
кислот и других соединений травы хвоща полевого.
Описание:
Аморфный порошок коричневого цвета, гигроскопичен. В герметически закрытой
таре сохраняет сыпучесть, при доступе влаги комкуется.
Своеобразный вкус и запах.
Растворимость: растворим в воде, спирте.
Подлинность.
Реакция на кремний. Образование желтого и синего кремнемолибденового
комплекса с молибдатом аммония в кислой среде. В качестве восстановителя
использовали аскорбиновую кислоту.
К сухому экстракту добавляли 2% раствор хлористоводородной кислоты, добавляли
2 мл 10%-го подкисленного раствора молибдата аммония, наблюдали желтое
окрашивание, при добавлении нескольких кристалликов аскорбиновой кислоты
раствор становился интенсивно-синего цвета.
Реакция на сапонины тритерпеновой природы.
К 0,1 г экстракта добавить 2 мл воды и добавить несколько капель основного
ацетата свинца. Появляется белый осадок, подтверждающий наличие сапонинов
тритерпеновой природы.
Реакция пенообразования (см выше).
Хранение:
В сухом защищенном от света месте при темпиратуре не выше 20°С.
Технологическая схема производства.
ТП 1. Получение исходного извлечения.
1.1 Измельчение травы хвоща полевого.
1.2Удаление пыли.
1.3 Экстракция сырья.
1.4 Отстаивание извлечения.
1.5 Фильтрация извлечения.
ТП 2. Получение готового продукта.
2.1 Упаривание извлечения.
2.2 Сушка извлечения.
2.3 Измельчение готового продукта.
2.4 Фасовка и оформление готовой продукции.
Промежуточные продукты. Сырье. Материалы.
Основным сырьем для получения экстракта хвоща полевого сухого на стадии ТП-1
является измельчение до частиц размером 7мм травы хвоща полевого,
освобождение от пыли (частиц менее 0,25мм). Влажность не более 13%, золы
общей не более 24%.
В качестве экстрагента использовалась вода очищенная при температуре 100°С в
момент подачи на сырье.
На стадии ТП-2. Получаем готовый продукт-комплекс водорастворимых веществ,
состоящи из: сапонинов, дубильных веществ, полисахаридов, алифатических
кислот и других соединений.
Требования к качеству применяемых в производстве сырья и материалов.
Таблица 16
№ наимен-е сырья и материалов № ГОСТ или ТУ Квалификация Сорт или артикул % сод-я осн. вещества
1. Трава хвоща полевого ФС № 50 %
2. Вода очищенная ФС №
Часть 1 | Часть 2 | Часть 3 | Часть 4
Закладки по теме: хвощ
Голосов: 1
Просмотров: 11265
Комментариев: 0
Комментариев: 0
